Kalkulator Kepekatan Protein

Kategori: Biologi
- Mei 16, 2025
| |
Nilai tipikal berkisar antara 0.5 hingga 2.0
Cuvette standard mempunyai panjang jalur 1 cm
Jika sampel telah dicairkan sebelum pengukuran (contoh, 5 = 1:5 pengenceran)

Konsentrasi protein menggunakan absorbansi pada 280 nm (A280) ditentukan menggunakan Hukum Beer-Lambert:

\[ C = \frac{A}{\epsilon \times l} \]

di mana:

  • \( C \) = Konsentrasi protein (mg/mL)
  • \( A \) = Absorbansi pada 280 nm
  • \( \epsilon \) = Koefisien ekstinksi (L·g⁻¹·cm⁻¹)
  • \( l \) = Panjang jalur kuvet (cm)

Apa itu Kalkulator Konsentrasi Protein?

Kalkulator Konsentrasi Protein membantu menentukan konsentrasi protein menggunakan berbagai metode, termasuk:

  • Absorbansi pada 280 nm (A280): Metode cepat dan tidak merusak berdasarkan asid amino aromatik.
  • Uji Bradford: Metode kolorimetri menggunakan pengikatan pewarna.
  • Uji BCA (Asid Bikinchoninik): Metode yang bergantung pada pengurangan tembaga dan pengesanan kolorimetri.
  • Uji Lowry: Pendekatan yang sudah mapan menggunakan interaksi protein-tembaga.

Bagaimana Menggunakan Kalkulator

Ikuti langkah-langkah ini untuk mengira konsentrasi protein:

  • Pilih metode pengukuran (A280, Bradford, BCA, atau Lowry).
  • Masukkan nilai yang diperlukan seperti absorbansi, faktor pengenceran, dan koefisien ekstinksi (jika perlu).
  • Jika menggunakan metode kurva standard (Bradford, BCA, atau Lowry), masukkan parameter kurva.
  • Klik butang "Kira" untuk mendapatkan hasil konsentrasi.

Manfaat Menggunakan Kalkulator

  • Menjimatkan masa dengan mengautomatikkan pengiraan konsentrasi.
  • Menyokong pelbagai metode pengukuran untuk fleksibiliti.
  • Termasuk kalkulator pengenceran untuk menyediakan konsentrasi tertentu.
  • Mengurangkan kesilapan manusia dalam pengiraan manual.

Soalan Lazim

1. Seberapa tepat metode Absorbansi (A280)?

Metode A280 umumnya tepat untuk protein tulen tetapi boleh dipengaruhi oleh pencemar seperti asid nukleik.

2. Bolehkah saya menggunakan Uji Bradford untuk semua protein?

Uji Bradford berfungsi dengan baik untuk kebanyakan protein tetapi mungkin memberikan hasil yang berbeza bergantung pada komposisi protein.

3. Apa kelebihan Uji BCA?

Metode BCA lebih serasi dengan detergen dan mempunyai julat linear yang lebih luas daripada Bradford.

4. Bagaimana saya memilih koefisien ekstinksi yang betul untuk A280?

Gunakan nilai yang diterbitkan untuk protein yang diketahui, atau kira koefisien ekstinksi berdasarkan komposisi asid amino.

5. Mengapa saya memerlukan faktor pengenceran?

Jika sampel anda dicairkan sebelum pengukuran, anda mesti mengalikan konsentrasi yang dikira dengan faktor pengenceran untuk mendapatkan konsentrasi akhir yang betul.